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耗材專區(qū) EZsepTM MAX固相萃取柱檢測動物性食品中碘醚柳胺殘留量

更新時間:2024-08-08       點擊次數(shù):256

前言:

碘醚柳胺是鹵化水楊酰苯胺類殺吸蟲藥,可以抑制蟲體線粒體的磷酸化過程,從而阻止蟲體內(nèi)三磷酸腺甙Chemicalbook(ATP)的合成,導(dǎo)致蟲體能量代謝的活力迅速減弱而死亡。它與血液蛋白有很強的親和力,所以藥效在血液中有較長的持續(xù)時間,造成藥物在動物體內(nèi)富集,而人類食用這些肉類會使獸藥殘留進入人體,從而影響身體健康。

本文參照《動物性食品中碘醚柳胺殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(征求意見稿)》,利用EZsepTMMAX固相萃取柱(60 mg/3mL,貨號:PZ12802進行凈化,再用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進行檢測,建立了一種對動物性食品中碘醚柳胺殘留量的分析方法。


關(guān)鍵詞:

動物性食品,碘醚柳胺,固相萃取

1, 實驗過程

1.1 儀器與試劑  

MPREP-SPE08手動固相萃取裝置,貨號:PZ0008,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司

E.T.氮吹濃縮儀,貨號:C020017,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;

4500質(zhì)譜系統(tǒng),SCIEX公司;

EZsepTMMAX固相萃取柱(60 mg/3mL貨號:PZ12802,北京萊伯帕茲檢測科技有限公司;

冷凍離心機,GL-20G-,上海安亭科學(xué)儀器廠  ;  

甲醇(色譜純),購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司;

乙腈(色譜純),購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司;

甲酸,氨水,三乙胺等化學(xué)品均為分析純或以上,購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司

1.1 工作液配制

碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):100mg/瓶,購自壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心 。

碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)儲備液:取碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)品適量(相當(dāng)于有效成分約10mg),精密稱定,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為1000μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)儲備液。

碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間液:移取碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)儲備液0.1mL,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為10μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間液。

碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)使用液:碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)中間液0.1mL,用乙腈稀釋至10mL容量瓶中,配制成濃度為0.1μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)使用液。

分別移取0.1μg/mL的碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)使用液0.02、0.1、0.5、2.0、5.0mL分別置于10mL容量瓶中用甲醇定容至刻度,標(biāo)準(zhǔn)濃度為0.2 μg/L、1μg/L、5μg/L、20μg/L、50μg/L。

1.3 實驗部分

1.3.1 樣品制備

取羊腰試樣2g,置于50 mL聚丙烯離心管中,加10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液均質(zhì)5min,超聲提取10 min,8000 r/min離心5 min,收集上清液至另一50 mL離心管中殘渣中加10.0 mL 1%三乙胺乙腈溶液,重復(fù)提取一次,合并兩次上清液,混勻,取提取液5.0 mL備用待凈化。

1.3.2 固相萃取凈化

EZsepTMMAX固相萃取柱(60 mg/3mL,貨號:PZ128025mL乙腈進行活化,取1.3.1待凈化液上樣,上樣結(jié)束后用5mL乙腈淋洗萃取柱,再用5mL 5%甲酸乙腈洗脫萃取柱,收集洗脫液,E.T.氮吹濃縮儀45℃氮氣濃縮至近干,加2.0 mL甲醇,渦旋混勻過微孔濾膜后供LC-MS/MS測定。

1.3.3 LC-MS/MS儀器條件

色譜柱:Shim-pack Velox C18(2.7μm,2.1*100mm);

檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)測(MRM);

流動相:A:0.1%氨水水溶液 B: 甲醇;

流速:0.3mL/min;

進樣量:5μL。

1流動相梯度洗脫表

時間min

流動相A%

流動相B%

0

70

30

5

0

100

8

0

100

8.1

70

30

10

70

30

1, 實驗結(jié)果

耗材專區(qū)  EZsepTM MAX固相萃取柱檢測動物性食品中碘醚柳胺殘留量

1 標(biāo)液色譜圖

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2碘醚柳胺標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

1, 結(jié)論

本次實驗展示了使用EZsepTMMAX固相萃取柱(60 mg/3mL,貨號:PZ12802對動物性食品中碘醚柳胺殘留量進行凈化,通過高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進行測定,其加標(biāo)回收率在85.0%~93.3%之間,RSD在3.6%,能夠滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。說明EZsepTMMAX固相萃取柱(60 mg/3mL,貨號:PZ12802能很好的完成方法中的凈化工作,并且結(jié)果穩(wěn)定、可靠。

2, 參考文獻(xiàn)

1. 《動物性食品中碘醚柳胺殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(征求意見稿)》

1   加標(biāo)回收率結(jié)果

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